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熒光檢測(cè)器的檢測(cè)原理及定量基礎(chǔ)
2017-11-27 [1868]
   熒光檢測(cè)器的檢測(cè)原理:
  化合物受紫外光激發(fā)后,發(fā)射出比激發(fā)光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光,稱為熒光;
    熒光強(qiáng)度 (F) 與激發(fā)光強(qiáng)度 (I0) 及熒光物質(zhì)濃度 (C) 之間的關(guān)系為:F=2.3QKI0εCl    F=KC
   Q為量子產(chǎn)率,K為熒光效率,ε為摩爾吸光系數(shù),l為光徑長(zhǎng)度。
熒光檢測(cè)器的定量基礎(chǔ):
    在光致發(fā)光中,發(fā)射出的輻射總依賴于所吸收的輻射量。由于一個(gè)受激發(fā)的分子回到基態(tài)時(shí)可能以無(wú)輻射躍遷的形式產(chǎn)生能量損失,因而發(fā)射輻射的光子數(shù)通常都少于吸收輻射的光子數(shù),它以量子效率Q來(lái)表示。
    在固定的實(shí)驗(yàn)條件下,量子效率是個(gè)常數(shù),通常Q小于1。對(duì)可用熒光檢測(cè)的物質(zhì)來(lái)說(shuō),Q值一般在0.1~0.9之間。熒光強(qiáng)度F與吸收光強(qiáng)度成正比。
    對(duì)于稀溶液,熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)溶液濃度、摩爾吸光系數(shù)、吸收池厚度、入射光強(qiáng)度、熒光的量子效率及熒光的收集效率等成正相關(guān)。在其他因素保持不變的條件下,物質(zhì)的熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)溶液濃度成正比,這是熒光檢測(cè)器的定量基礎(chǔ)。熒光檢測(cè)器屬于溶質(zhì)型檢測(cè)器,可直接用于定量分析。
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