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HPLC-ELSD測(cè)定黃芪注射液中黃芪甲苷的含量
2011-11-10 [3713]

摘要

黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根。春秋兩季采挖,除去須根及根頭,曬干。由于來(lái)源、產(chǎn)地、處理方式的不同,會(huì)導(dǎo)致黃芪的質(zhì)量*不同,從而直接影響其藥用價(jià)值,因此必須建立一套完整的質(zhì)量控制方法。

內(nèi)容

HPLC-ELSD檢測(cè)方法測(cè)定黃芪注射液中黃芪甲苷的含量

 

黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)

Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。春秋兩季采挖,除去須根及根頭,曬干。

由于來(lái)源、產(chǎn)地、處理方式的不同,會(huì)導(dǎo)致黃芪的質(zhì)量*不同,從而直接影響其藥用價(jià)值,因此必須建立一套完整的質(zhì)量控制方法。

一、實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1.1 儀器

ELSD MODEL 200  SofTA Coporation

  液相系統(tǒng):泵

  工作站:色譜采集系統(tǒng)

1.2 試劑

乙腈:色譜純

  :純凈水

甲醇:色譜純

黃芪甲苷對(duì)照品;黃芪注射液;黃芪陰性試劑

1.3 色譜系統(tǒng)及ELSD參數(shù)

  色譜柱:C18    250×4.6mm

流動(dòng)相:乙腈:水(3268

流速:1.00 mL/min

ELSD參數(shù): DF=60℃SC=30℃

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下圖為在上述色譜條件下測(cè)定的黃芪對(duì)照品與黃芪注射液ELSD色譜圖:

1.4 曲線方程及線性關(guān)系

取對(duì)照品溶液配制成0.1、0.3、0.5、0.7、1mg/mL的溶液,以濃度對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo),以峰面積對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo)作回歸,方程為:y=1.48528x+2.26890,r2=0.9997,進(jìn)樣量為20μL(滿環(huán)進(jìn)樣,濃度在0.1-1mg/mL呈良好的線性關(guān)系。

1.5 系統(tǒng)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)

取供試品溶液2.0mL,按上述色譜條件,滿環(huán)進(jìn)樣20μL,黃芪甲苷的保留時(shí)間為9.5min左右,理論塔板數(shù)不低于10000,托尾因子為1.06左右,分離度不小于5.0。

1.6樣品的含量測(cè)定

分別取黃芪注射液三批,按上述色譜條件,滿環(huán)進(jìn)樣20μL。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1

1樣品中黃芪甲苷的含量測(cè)定

 

 

批號(hào)

含量mg

0509101

2.35

0509103

1.98

0509105

2.17

 

二、討論

ELSD主要用于沒(méi)有紫外吸收或?yàn)樽贤饽┒巳跷盏臉悠?,或流?dòng)相有紫外吸收干擾或梯度洗脫時(shí)基線漂移影響測(cè)定;ELSD檢測(cè),流動(dòng)相在漂移管便氣化蒸發(fā),不影響樣品檢測(cè)。

黃芪甲苷是黃芪為原料的中藥制劑的主要質(zhì)量控制指標(biāo)。其含量測(cè)定方法有薄層色譜、HPLC—紫外放,采用ELSD作為檢測(cè)器—HPLC法也已見(jiàn)報(bào)道,但都存在樣品前處理復(fù)雜、色譜干擾多且干擾成分大等缺點(diǎn)。

由于ELSD本身的響應(yīng)特性,黃芪甲苷濃度與其峰面積值并不呈線性,而將濃度與峰面積同時(shí)取以10為底的對(duì)數(shù)后可在一定范圍內(nèi)(0.11mg/ml)得到理想的線性關(guān)系(r2=0.9997)。

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